<p class="ql-block">身邊常常會有人問起關(guān)于新冠核酸檢測的若干問題：</p><p class="ql-block">為什么核酸檢測需要好幾個小時？</p><p class="ql-block">為什么曾報道說有人幾次檢測都陰性后來突然陽性？</p><p class="ql-block">我排隊采樣的時候與某某人一前一后為什么他的結(jié)果出來了我卻比他晚？</p><p class="ql-block">為什么我這么著急你不能給我這個標(biāo)本塞進去快點出結(jié)果？</p><p class="ql-block">為什么新冠核酸陽性了就說這個人被確診了？</p><p class="ql-block">總之，十萬個為什么，我希望通過這篇文章能給大家的問題找到一些答案！</p> <h3>提出的問題不僅是以上那些，還有更多更多…</h3> <h3>呼吸道病毒感染人體之后，首先會在呼吸道上皮細(xì)胞中“扎根”繁殖。因此，上呼吸道標(biāo)本（鼻咽拭子、咽拭子、痰液以及肺泡灌洗液）檢測的陽性率是最高的。由于在感染病毒的初期，病毒可能還沒有侵入到患者的血液，此時檢測血液中的病毒核酸很可能會是陰性，這樣的假陰性結(jié)果就會導(dǎo)致漏檢。</h3> <p class="ql-block">核酸是地球上幾乎所有生物的遺傳物質(zhì)，核酸分為脫氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）。病毒核酸位于病毒的內(nèi)部，病毒的外部是由蛋白或者脂蛋白組成的保護型外殼。</p><p class="ql-block">核酸能決定病毒的毒性、傳播性、變異性等特性，是區(qū)分每種病毒最精準(zhǔn)的標(biāo)識。</p><p class="ql-block">所以，如果檢測到了新型冠狀病毒的核酸，就能證明此人被新冠病毒感染。</p> <p class="ql-block">采樣人員需要經(jīng)過專業(yè)的培訓(xùn)的?？谱o士來完成，采樣過程中她們要按照《醫(yī)療機構(gòu)新冠病毒核酸檢測工作手冊》防控要求做好三級生物安全防護，同時還要做好信息的采集和確認(rèn)工作。</p><p class="ql-block">采樣的質(zhì)量非常重要，否則即使PCR的方法再高大上，如果采集不到需要檢測的病毒也就無法保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。</p> <p class="ql-block">別小看了這些紅色的采樣管。采樣后，將拭子放入病毒保存液中，保存液中含有胍鹽，胍鹽使蛋白質(zhì)外殼變性，把蛋白質(zhì)“外衣”給拔了，才能將病毒的核酸釋放出來，露出病毒的“真面目”。</p><p class="ql-block">同時保存液可保持病毒核酸的活性與完整性，以便于后邊繼續(xù)核酸檢測工作。保存液中還含有多種抗生素，這樣可以抑制樣本中其它細(xì)菌和真菌的生長。</p><p class="ql-block">保存液的這些“功能”，可以避免在核酸實驗室工作的同行們受到各種病原體的感染。</p> <h3>采樣管運送到核酸實驗室可不是隨隨便便就啟程。要有三層專用包裝，運送人員也要做好防護，走醫(yī)院規(guī)定專用的通道，避免污染環(huán)境和感染他人。</h3> <h3>紅色蓋子的采樣管的三層包裝要在生物安全柜里層層打開，直立放在試管架上。雖然這項工作看似簡單，但太大的實驗室不說，我們這個小實驗室一天最多就收到兩千多個樣本，那么，這項工作做起來就是費力，也費勁！</h3> <h3>從此，新型冠狀病毒核酸檢測正式進入了檢驗的流程。新冠病毒核酸只是眾多病原體核酸檢測的其中一項。核酸檢測方法廣泛應(yīng)用于病原微生物檢測中，作為診斷疾病和監(jiān)測病毒載量的重要手段。</h3> <h3>第一部，核酸的提取。這一步驟對檢測的質(zhì)量至關(guān)重要。例如，對核酸純度、提取效率、精密度等、試驗方法等都有相關(guān)規(guī)范，這樣才能把含有病毒的樣本準(zhǔn)確檢測出來。核酸提取過程大概20-40分鐘。有人也向我們提出過質(zhì)疑，不是說最快的才幾分鐘嗎？我個人認(rèn)為，片面的追求速度，可能就會犧牲檢驗質(zhì)量，不過，這純屬個人觀點啊。</h3> <h3>這是所有做過PCR實驗的檢驗人員再熟悉不過的神器——俗稱“加樣槍”，學(xué)名“移液器”。</h3> <h3>每次吸取一個樣本需要換一個加樣槍頭。在這里，必須更改一下“十進制的”思路，整個過程都是“八進制”，類似于計算機系統(tǒng)的“二進制”？</h3> <h3>把一定體積的樣本依次按照順序加入到提取板的孔位里。</h3> <h3>經(jīng)過我們的操作和提取設(shè)備一頓鼓搗，“咣咣當(dāng)當(dāng)”半個多小時，新冠檢測的這段路程結(jié)束。</h3> <p class="ql-block">盡管有了三臺設(shè)備，但是我們?nèi)藛T加樣速度總是超過了機器的運轉(zhuǎn)速度，其實還是因為樣本多，檢驗科的家人都是“恨活”的人，所以經(jīng)常是加好樣的提取板在設(shè)備前排隊等候入場。</p> <h3>經(jīng)過反復(fù)的吸附、洗脫后，核酸終于與病毒的蛋白質(zhì)與細(xì)胞碎片說“拜拜”了，“清清白白”地停留在自己應(yīng)在的位置。</h3> <h3>這時，在比較潔凈區(qū)域的工作人員已經(jīng)根據(jù)標(biāo)本的例數(shù)配制核酸擴增試劑了。他們要遵照事先書寫的“SOP文件”把花花綠綠的各種顏色蓋子的小瓶中液體按照一定比例把幾種試劑混勻。試劑不可以多配制，因為要保持試劑的穩(wěn)定性。</h3> <h3>配制好的試劑按照一定體積和人份分裝到八連管中。</h3> <h3>每次分裝一排，還要看看是否準(zhǔn)確加樣。這個過程也完全是手工操作。而且，在核酸檢測的過程中，一定要動作輕柔，準(zhǔn)確到位！</h3> <h3>當(dāng)然，必不可少的混均和離心過程一直伴隨試劑配制過程中。</h3> <h3>進入新冠核酸檢測第二步——核酸的擴增。當(dāng)他識別到“目標(biāo)”病毒的“特點”——特異性的片段，馬上一前一后“抓捕”，再添加dNTP、Mg2+、Taq酶等原材料，調(diào)節(jié)不同的溫度，歷經(jīng)“變性-退火-延伸”三大步，完成病毒核酸組裝。每擴增一次，DNA產(chǎn)量呈指數(shù)增長。新冠病毒擴增一般需要40個循環(huán)，理論上1個待測基因可以得到2的40次方的數(shù)量，即1,099,511,627,776個。即使樣本中病毒含量很低，都可以通過PCR擴增檢測出來。因此PCR反應(yīng)有高特異性和高靈敏度的特點。</h3> <h3>再一次使用加樣神器，把提取好的每個核酸樣本加入到對應(yīng)的核酸擴增試劑的反應(yīng)孔中?？简炄瞬唬?！幾百個甚至幾千個樣本，要做到眼不花，手不抖，心不亂，容易嗎？</h3> <h3>加樣后，經(jīng)過快速離心，把一排排小管管整齊擺放到擴增設(shè)備中。牢牢記住，反復(fù)用大拇指肚把八連管的塑料蓋壓緊，壓實，否則，一百度的加溫要是引起“崩管”，后果就不堪設(shè)想了。每日下來，大拇指疼痛加麻木！！</h3> <p class="ql-block">我們再給擴增儀多條指令，它開始“嗷嗷嗷”地就進入工作狀態(tài)了。這是反復(fù)升溫～降溫～升溫…特有的聲音。</p> <p class="ql-block">這個過程是80分鐘到120分鐘不等。然后分析數(shù)據(jù)，讀取結(jié)果。我們特別怕看到待測基因出現(xiàn)圖中S型的曲線或者紅色的提示或者＜40的某些數(shù)字，因為這是陽性結(jié)果的標(biāo)志。不過，大家不用擔(dān)心，圖中的“陽性”是我們每批實驗中必須要帶的陽性對照，是為了監(jiān)控每批次的檢驗質(zhì)量呢。錦州還沒有陽性病例??！</p> <p class="ql-block">這是我們工作時的安全防護和負(fù)壓環(huán)境的照片。生物安全防護是為了保證檢驗人員不被感染；負(fù)壓環(huán)境是為了保證醫(yī)院環(huán)境不被污染。但是可想而知，這樣的裝備和這樣的條件會給我們每個檢驗人員帶來怎樣不適的感受，無法用語言形容。為了更好地完成這項工作，我們也是拼了！</p> <p class="ql-block">到此為止，是不是能回答大家常常思考的并且提出的一些問題了呢？</p><p class="ql-block">對了，引用我一個同事給患者“答疑”時的一段“妙語”：</p><p class="ql-block">你說，這個位置都已經(jīng)被前邊人占上了，你提要求加塞，你說把誰的標(biāo)本撇走給你騰地方？</p><p class="ql-block">再說了，剛做這一批，即使有空位也不能隨便再擠進去標(biāo)本。這就像蒸饅頭，中間不能揭鍋，否則就會有夾生的！</p><p class="ql-block">你和前邊的人僅差一步，他的結(jié)果出來了你的結(jié)果沒出來，就是因為你趕在下一鍋里了，懂沒？</p><p class="ql-block">佩服不？這神回答！</p> <p class="ql-block">是不是做完實驗整個核酸檢測工作就結(jié)束了？當(dāng)然沒有！我們需要依靠強大的信息系統(tǒng)建立報告單，之后要審核檢驗結(jié)果。有時候，最多每天幾千個標(biāo)本，可能數(shù)（鼠）起數(shù)（樹）來，十進位都會錯，不信你來試試？</p><p class="ql-block">這樣，每個進行核酸檢測的人員可以通過紙質(zhì)版或者電子版的信息得到本人的核酸檢測結(jié)果。</p> <p class="ql-block">不知道大家是否思考過，為何在你自己手機的APP上能夠查到結(jié)果？那是因為每個醫(yī)療單位都有幕后工作者每天把海量數(shù)據(jù)通過指定的方式上傳疾控網(wǎng)站，并且嚴(yán)格保密每個人的個人信息。</p> <p class="ql-block">以下是新冠核酸檢測流程圖。</p> <p class="ql-block">如果你需要，我們還提供出境專用的中英文報告。</p> <p class="ql-block">需要補充的是，核酸檢測工作不僅僅是以上的內(nèi)容和在媒體上展示的林林總總，還有諸多工作是非本專業(yè)的人無法知曉的：比如說實驗室的質(zhì)量控制和室間質(zhì)評；比如說定期對實驗室壓力、環(huán)境、幾十種設(shè)備器械的檢定；比如說實驗室內(nèi)復(fù)雜的消毒流程；比如說假陽性的數(shù)據(jù)分析和判斷…都是我們每天不可或缺的嚴(yán)謹(jǐn)而復(fù)雜工作過程。</p> <p class="ql-block">親愛的小伙伴們，你們是不是和我一樣有時有些抓狂？</p><p class="ql-block">每天接到的文件40%和疫情防控有關(guān)；</p><p class="ql-block">學(xué)習(xí)和培訓(xùn)的內(nèi)容50%是核酸檢測；</p><p class="ql-block">電話溝通和微信回復(fù)60%與核酸關(guān)聯(lián)；</p><p class="ql-block">核酸實驗室后半夜下班的幾率是70%…</p> <p class="ql-block">但，職責(zé)所在，我們從不推脫責(zé)任，從不計較得失！</p><p class="ql-block">付出終有回報，我們的工作得到了醫(yī)院、社會、政府的充分肯定！</p><p class="ql-block">繼續(xù)！加油！</p><p class="ql-block">惟有奮斗，方能致遠(yuǎn)??！</p>