學(xué)核酸檢測(cè)原理,做積極抗疫人 <p class="ql-block"> 疫情當(dāng)前,人人有責(zé)!西安市組織全員核酸檢測(cè),排查疫情,我們建大附中全體師生積極參加,理化生組的全體成員更在積極宣傳抗疫知識(shí)!</p><p class="ql-block"> 作為積極抗疫人,我們一起來了解核酸檢測(cè)的原理及操作。</p> <p class="ql-block" style="text-align: center;">1.核酸檢測(cè)新冠病毒的原理</p> <p class="ql-block">① 提取病毒的RNA</p><p class="ql-block"> 先從樣本中提取出病毒的RNA。具體來說,就是在樣本中加入核酸提取試劑,把病毒破壞,讓核酸釋放出來。</p><p class="ql-block">② 把病毒RNA“反轉(zhuǎn)錄”成cDNA</p><p class="ql-block"> 通過 反轉(zhuǎn)錄技術(shù)(RT),把病毒的RNA“反轉(zhuǎn)”成一種特異DNA,即cDNA (因?yàn)椴《綬NA結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定,所以把病毒RNA轉(zhuǎn)換成穩(wěn)定的cDNA會(huì)更方便檢測(cè))</p><p class="ql-block"> 這里會(huì)用到核酸檢測(cè)試劑盒中一種叫“反轉(zhuǎn)錄酶”的物質(zhì)。而完成轉(zhuǎn)錄后,所有工作都將圍繞cDNA展開。</p><p class="ql-block">③ 進(jìn)行cDNA的擴(kuò)增與檢測(cè)</p><p class="ql-block"> 簡(jiǎn)單說就是擴(kuò)增cDNA的數(shù)量。這里應(yīng)用的就是PCR,全稱聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。具體來說,就是借助試劑盒中一些特殊物質(zhì),讓cDNA不斷復(fù)制,使其數(shù)量呈指數(shù)式增長(zhǎng)。</p><p class="ql-block"> 所謂RT-PCR,就是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的擴(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。</p><p class="ql-block"> 當(dāng)cDNA擴(kuò)增的同時(shí),試劑盒中還有一種叫熒光探針的東西同時(shí)工作。它會(huì)釋放熒光信號(hào),cDNA每完成一次擴(kuò)增,熒光信號(hào)就會(huì)增加一點(diǎn),而PCR檢測(cè)儀就能記錄到一個(gè)熒光信號(hào)增加的Ct值。</p><p class="ql-block">④ 出結(jié)果</p><p class="ql-block"> 這一步就是根據(jù)檢測(cè)儀記錄的Ct值,進(jìn)行檢測(cè)結(jié)果分析。</p><p class="ql-block"> 理想狀態(tài)下,如果樣本中有新冠病毒,那么在cDNA完成預(yù)訂次數(shù)的擴(kuò)增后,檢測(cè)儀記錄的Ct值就會(huì)形成一個(gè)逐漸上升的S形曲線,檢測(cè)結(jié)果為陽性;如果沒有類似的S型曲線,檢測(cè)結(jié)果為陰性。</p><p class="ql-block"> 做完以上所有工作,通常需要4~6小時(shí)。</p> <p class="ql-block" style="text-align: center;">2.其他檢測(cè)新冠病毒的技術(shù)</p> <p class="ql-block ql-indent-1">對(duì)受測(cè)者來說,從標(biāo)本中分離出病毒是最權(quán)威的確診依據(jù),但是,分離病毒是比較危險(xiǎn)的操作,需要在高防護(hù)級(jí)別的實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行,而且耗時(shí)比較長(zhǎng)、成本較高。一般醫(yī)療機(jī)構(gòu)不具備這個(gè)條件,他們大多會(huì)采取檢測(cè)血液中是否有病毒抗體的方法,來判斷受測(cè)者是否感染了病毒,乙肝、艾滋病等都是通過這種方式進(jìn)行檢測(cè)的。</p><p class="ql-block"> 新冠病毒也可以通過這種免疫學(xué)檢測(cè)的方法檢測(cè)出來。面對(duì)新冠病毒的入侵,人體會(huì)進(jìn)行“反抗”,產(chǎn)生特異性抗體IgM和IgG(免疫球蛋白M和免疫球蛋白G)。如果在受測(cè)者血液中檢測(cè)出這兩種特異性抗體,就可以說明受測(cè)者感染了新冠病毒。</p><p class="ql-block"> 怎么檢測(cè)抗體呢?常用的是化學(xué)發(fā)光免疫分析法,也就是使用化學(xué)發(fā)光劑或特定的酶標(biāo)記抗體或抗原,發(fā)生免疫反應(yīng)形成復(fù)合物,洗滌后再加入發(fā)光劑,如果受測(cè)者血液中存在IgM和IgG這兩種特異性抗體,化學(xué)發(fā)光儀就能檢測(cè)到發(fā)光信號(hào)。這種化學(xué)發(fā)光免疫分析法,是目前最先進(jìn)的免疫檢測(cè)技術(shù)之一。它靈敏度高、特異性強(qiáng)、檢測(cè)范圍寬、出結(jié)果快,但檢測(cè)成本較高。</p> <p class="ql-block" style="text-align: center;">3.哪種檢測(cè)最實(shí)用,最高效?</p> <p class="ql-block ql-indent-1">由于人體感染病毒后需要一定時(shí)間才能產(chǎn)生抗體,只有等抗體產(chǎn)生后才能檢測(cè)到,這也導(dǎo)致抗體檢測(cè)的時(shí)效性不強(qiáng)。乙肝、艾滋病等感染后需要2~3周才能產(chǎn)生抗體。新冠病毒感染后需要3天以上才能檢測(cè)到IgM抗體,需要一周以上才能檢測(cè)到IgG抗體。</p><p class="ql-block ql-indent-1">所以,為了盡快抓住新冠病毒的尾巴,應(yīng)用更多的是核酸檢測(cè),它可以更早發(fā)現(xiàn)新冠病毒的蹤跡!</p> <p class="ql-block ql-indent-1">我們附中人將積極響應(yīng)政府的各項(xiàng)抗疫政策,積極參加核酸檢測(cè)。我們堅(jiān)信:冬天會(huì)去,春天必來,風(fēng)雨過后,必有陽光!待到鶯飛草長(zhǎng)之際,你們定能在熟悉的校園里繼續(xù)奮斗,一路向前!</p><p class="ql-block" style="text-align: center;">———————————</p> <p class="ql-block">來源:理化生組</p><p class="ql-block">圖文:楊蕊</p><p class="ql-block">編輯:楊偉偉</p><p class="ql-block">審核:周清華</p>