<p class="ql-block">2023年10月23日，科學(xué)松鼠會的活動主題是制備蛙坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本。</p> <p class="ql-block">任老師首先講解實驗?zāi)康?、實驗原理和實驗步驟，然后由同學(xué)們分組實驗。</p> <p class="ql-block">實驗?zāi)康模?lt;/p><p class="ql-block">1.掌握蛙的坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本的制備方法。</p><p class="ql-block">2.觀察組織的興奮性、刺激與反應(yīng)規(guī)律以及腓腸肌收縮的特點。</p><p class="ql-block">3.掌握并熟悉生理學(xué)實驗常用器械的使用和基本操作技術(shù)。</p><p class="ql-block">實驗原理：</p><p class="ql-block">1.牛蛙屬于兩棲動物，一些基本生命活動和生理機能與溫血動物相似，其立體組織、器官保持活性所需的環(huán)境條件比較簡單，易于控制和掌握，置于任氏液中可以維持較長時間的活性，所以生理實驗中常用之為實驗標(biāo)本。</p><p class="ql-block">2.坐骨神經(jīng)和腓腸肌都屬于可興奮組織，給予坐骨神經(jīng)一個適宜的刺激可產(chǎn)生一個可傳導(dǎo)的動作電位，引起其所支配肌肉（腓腸?。┑氖湛s。制作坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本可用于研究觀察組織的興奮性、傳導(dǎo)性以及刺激與肌肉收縮等基本生理現(xiàn)象和過程。</p><p class="ql-block">實驗材料：牛蛙</p><p class="ql-block">實驗器材：</p><p class="ql-block">鋅銅弓、不銹鋼托盤（用于放置動物尸體）、玻璃培養(yǎng)皿、解剖盤、骨剪、直剪、有齒鑷、塑料滴管、解剖針、玻璃分針、任氏液、棉線。</p> <p class="ql-block">實驗步驟：</p><p class="ql-block">1.破壞腦和脊髓</p><p class="ql-block">(1)取牛蛙一只，用自來水沖洗干凈。</p><p class="ql-block">(2)左手握住牛蛙，用食指按壓其頭部前端，拇指按壓背部，小指壓住腿。右手持解剖針刺蛙毀髓。由于本次實驗用的牛蛙較大，需要一位同學(xué)雙手固定蛙體，另一位同學(xué)毀髓。具體方法是：將解剖針垂直從枕骨大孔刺入1mm，向上進入顱腔，左右攪動充分搗毀腦組織。然后將刺蛙針抽回至進針處，再向下刺入脊椎管，反復(fù)上下抽插搗毀脊髓。牛蛙四肢松軟，呼吸消失，表明腦和脊髓已完全破壞。否則重復(fù)操作。</p> <p class="ql-block">2.剪除軀干上部及內(nèi)臟</p><p class="ql-block">在骶髂關(guān)節(jié)水平以上1.5-2.0cm處剪斷脊柱，左手握住牛蛙后肢，用拇指壓住骶骨，使頭與內(nèi)臟自然下垂，右手持普通剪刀，沿脊柱兩側(cè)剪除一切內(nèi)臟及頭胸部，留下后肢、骶骨、脊柱以及脊柱兩側(cè)的坐骨神經(jīng)。剪除過程中注意勿損傷坐骨神經(jīng)。</p> <p class="ql-block">3.剝皮和清洗器械</p><p class="ql-block">握緊脊柱斷端（注意不要握住或壓迫神經(jīng)），右手握住其上的皮膚邊緣，用力向下剝掉全部后肢的皮膚。把標(biāo)本放入盛有任氏液的培養(yǎng)皿中。</p><p class="ql-block">將手及用過的剪刀、鑷等全部手術(shù)器械洗凈，再進行下面步驟。</p> <p class="ql-block">4.分離兩腿</p><p class="ql-block">用鑷子夾住脊柱將標(biāo)本提起，背面朝上，剪去向上突起的尾骨（注意勿損傷坐骨神經(jīng)）然后沿正中線用剪刀將脊柱和恥骨聯(lián)合中央辟開兩側(cè)大腿，并完全分離。將兩條腿浸入任氏液的培養(yǎng)皿中。</p> <p class="ql-block">5.制作坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本</p><p class="ql-block">取一蛙腿置于蛙板上的玻璃板上</p><p class="ql-block">(1)分離坐骨神經(jīng)</p><p class="ql-block">將腿標(biāo)本腹面朝上放置，用玻璃針沿脊柱旁分離坐骨神經(jīng)，將坐骨神經(jīng)連同2~3節(jié)脊椎骨用骨剪從脊柱上剪下來。再將標(biāo)本背面朝上放置，把梨狀肌及其附近的結(jié)締組織剪去。循坐骨神經(jīng)溝（股二頭肌與半膜肌之間的裂縫處），找出坐骨神經(jīng)的大腿段。用玻璃針仔細剝離游離至腘窩，然后剪去從脊柱根部至腘窩的所有坐骨神經(jīng)分支。</p><p class="ql-block">(2)完成坐骨神經(jīng)小腿標(biāo)本</p><p class="ql-block">將分離干凈的坐骨神經(jīng)搭于腓腸肌上，在膝關(guān)節(jié)周圍剪掉全部大腿肌肉，然后在股骨中部剪去上段股骨，保留坐骨神經(jīng)小腿標(biāo)本。</p><p class="ql-block">(3)完成坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本</p><p class="ql-block">將上述坐骨神經(jīng)小腿標(biāo)本在跟腱處穿棉線結(jié)扎肌腱，于結(jié)扎處遠端剪斷跟腱。游離腓腸肌至膝關(guān)節(jié)囊，將小腿其余部分剪掉，這樣就制得一個具有附著在股骨上的腓腸肌并帶有支配腓肌的坐骨神經(jīng)的標(biāo)本。</p> <p class="ql-block">結(jié)扎肌腱</p> <p class="ql-block">6.檢查標(biāo)本興奮性</p><p class="ql-block">用經(jīng)任氏液潤濕的鋅銅弓輕輕接觸一下坐骨神經(jīng)，如腓腸肌發(fā)生迅速而明顯的收縮，則表明標(biāo)本的興奮性良好，即可將標(biāo)本放在盛有任氏液的培養(yǎng)皿中，以備實驗用。</p> <p class="ql-block">實驗結(jié)果：</p><p class="ql-block">制得坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本如圖所示</p><p class="ql-block"><br></p> <p class="ql-block">用經(jīng)任氏液潤濕的鋅銅弓輕輕接觸坐骨神徑，可以觀察到腓腸肌出現(xiàn)明顯的收縮，當(dāng)用鋅銅弓直接接觸腓腸肌的時候，也可觀察到明顯的收縮現(xiàn)象。</p> <p class="ql-block">實驗結(jié)論：</p><p class="ql-block">坐骨神經(jīng)和腓腸肌屬于可興奮組織，刺激坐骨神經(jīng)，能引起其所支配的腓腸肌收縮。</p><p class="ql-block">注意事項：</p><p class="ql-block">1.注意濕潤標(biāo)本，保持標(biāo)本活性。</p><p class="ql-block">2.避免用金屬接觸神經(jīng)，或夾傷神經(jīng)；不要過度牽拉神經(jīng)。</p><p class="ql-block">3.注意分離時要用玻璃分針，并且要順著肌肉的走向游離，一定要把周圍的結(jié)締組織剝離干凈。</p><p class="ql-block">4.每次刺激標(biāo)本后使肌肉休息30秒，連續(xù)刺激不可超過5秒。</p> <p class="ql-block">思考討論：為什么鋅銅弓一接觸坐骨神經(jīng)就能使腓腸肌發(fā)生收縮？</p><p class="ql-block">浸潤任氏液的鋅銅弓相當(dāng)于一個原電池，輕觸坐骨神經(jīng)后鋅銅弓得失電子形成電位差即電極電位，由于坐骨神經(jīng)屬于可興奮組織，對電刺激敏感，達到一定刺激強度，可產(chǎn)生動作電位。坐骨神經(jīng)產(chǎn)生的動作電位沿著神經(jīng)纖維傳導(dǎo)，到達神經(jīng)末梢的神經(jīng)肌接頭，通過神經(jīng)遞質(zhì)以電-化學(xué)-電的形式引起腓腸肌的興奮收縮。</p> <p class="ql-block">我們都成功制備了蛙坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本！</p>